lncRNA/miRNA在胰腺癌发生发展中的研究进展

ncRNA/miRNA在多种实体肿瘤中表达异常，参与肿瘤的增殖、侵袭、转移。胰腺癌是发病率较高、死亡率高的恶性肿瘤，通过深入研究lncRNA/miRNA在胰腺癌发生发展中的分子机制，可为胰腺癌的治疗提供新的靶点。     

白藜芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度(0,10,20,50,100,200 μmol/L)Res处理24,48,72 h对SGC7901细胞的抑制率.流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的早期凋亡率.电镜扫描观察SGC7901细胞形态学改变,分光光度法检测caspase-3活性.结果:Res在20-300 μmol/L浓度范围内,以浓度和剂量依赖的方式抑制胃癌细胞的增殖(P＜0.01).经0,10,20,50,100,200 μmol/L Res处理24 h后,细胞凋亡率分别为1.17%,3.73%,8.75%,23.35%,63.97%和70.10%,晚期凋亡和坏死的细胞比例分别为5.66%,7.22%,9.86%,6.91%,12.51%及11.98%,各组之间差异不大.电镜下见到典型的细胞凋亡的形态学改变.100 μmol/L Res处理后6 h caspase-3活性增加,18 h达高峰,24 h后下降,48 h仍高于正常(0.135±0.036 vs 0.069±0.008,P＜0.05).经20,50,100 μmol/L Res处理18 h后的细胞的caspase-3活性分别为0.169±0.017,0.247±0.028,0.353±0.044(P＜0.01),较对照组(0.063±0.006)分别增加2.68倍、3.92倍和5.61倍.结论:Res通过诱导caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

NO体外对肠上皮细胞表达紧密连接蛋白Occludin的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)对肠上皮细胞表达紧密连接蛋白Occludin的影响,以研究NO对肠黏膜屏障的作用机制.方法:将NO的供体Sin1与肠上皮细胞株Caco-2共培养24 h,采用MTT方法观察NO对肠上皮细胞的作用,并分别提取细胞蛋白和总RNA,采用免疫蛋白印迹(Westem blot)蛋白半定量方法和实时定量聚合酶链式反应(RO-PCR)方法检测不同NO浓度对Caco-2细胞表达紧密连接蛋白Occludin蛋白和mRNA表达的影响.结果:随着Sin1浓度升高(125,250,500和1000μmol/L)NO对细胞的杀伤作用产生并逐渐增大,Occludin蛋白表达量和mRNA的相对表达量与无Sin1刺激时蛋白及mRNA的表达量相比明显降低(蛋白:375±0.5,374±0.8,363±0.3.363±0.7 vs 398±0.7;mRNA:0.689±0.01,0.578±0.09,0.554±0.03,0.619±0.04 vs 1,均P<0.01).结论:NO可直接损伤肠上皮细胞,同时以剂量依赖形式在蛋白和分子水平影响紧密连接蛋白Occludin的表达.     

食管病变内镜黏膜剥离术中灌注二氧化碳对术后恢复的影响

目的探讨在全麻状态下行食管病变内镜黏膜剥离术术中灌注二氧化碳对术后机体恢复的影响。方法 2011年10月至2012年12月,对我院收治的接受食管黏膜剥离术治疗的患者72例,随机分成二氧化碳观察组和空气对照组。记录每个患者的手术时间,术后纵隔气肿或皮下气肿的发生例数以及气肿消退时间,术后住院时间。结果二氧化碳组和空气组的平均手术时间分别是(85±52)min和(87±55)min(P0.05),纵膈气肿(CT提示)或皮下气肿的发生率分别是31%和33%(P0.05)。二氧化碳组中发生气肿的患者术后气肿消退时间少于空气组,分别是(4.82±1.54)d和(5.83±1.8)d(P0.05)。二氧化碳组术后平均住院天数少于空气组,分别是(6.1±1.3)d和(7.0±1.8)d(P0.05)。结论食管病变的内镜黏膜剥离术中灌注二氧化碳气体能缩短术后恢复时间,提高术后恢复的质量。     

双歧杆菌四联活菌片联合美沙拉嗪对轻中度溃疡性结肠炎的疗效观察

目的观察双歧杆菌四联活菌片联合美沙拉嗪对轻中度溃疡性结肠炎患者的治疗效果。方法选取轻中度溃疡性结肠炎患者64例,随机分为观察组及对照组,每组32例,观察组给予美沙拉嗪联合双歧杆菌四联活菌片,对照组给予美沙拉嗪治疗,疗程为4周。比较两组患者临床疗效及治疗前后Mayo评分变化。结果两组患者治疗后临床表现均得到缓解,观察组有效率达96.67%,高于对照组的78.13%。同时,两组患者Mayo评分均下降,观察组下降5.88±2.46,较对照组(3.12±2.18)下降显著(P<0.05)。结论双歧杆菌四联活菌片联合美沙拉嗪对于轻中度溃疡性结肠炎患者诱导缓解具有较好疗效,可以进一步推广应用。     

应用高密度单核苷酸多态性芯片分析胰腺癌细胞基因缺失

目的探索胰腺癌癌变过程中的基因异常,研究胰腺癌基因组的纯合性缺失。方法应用高密度单核苷酸多态性芯片,检测17种胰腺癌细胞株基因组的纯合性缺失,并利用分析软件进行数据分析,用PCR验证纯合性缺失位点。结果17种胰腺癌细胞基因组中,发现70个区域纯合性缺失,其中28个区域无已知基因,42个区域有基因。35个区域经过PCR验证,29个区域经证实为纯合性缺失,芯片的准确度为82.9%,其中最小缺失区域为6kb。结论应用高解析度的SNP基因芯片可以检测胰腺癌全基因组范围内的精细的纯合性缺失位点。     

葡萄糖调节蛋白94在结肠腺癌中的表达及其意义

目的探讨结肠腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达及其与结肠腺癌分化程度、临床分期及转移等的关系。方法采用免疫组织化学S-P法分别检测结肠腺癌组织、结肠腺瘤组织及正常结肠组织GRP94表达情况,结合临床病理特征光学显微镜下用半定量方法对结果进行统计分析。结果正常组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有GRP94表达,其表达程度呈递增趋势。其表达程度随着细胞分化的降低、临床分期的增加及肿瘤转移而增高,与患者性别、年龄无关。结论GRP94的高表达可能参与结肠癌的发生、发展,对结肠癌肿瘤细胞有保护作用,抑制GRP94的表达有可能抑制肿瘤生长。     

人胃癌Runx3基因CpG岛甲基化的关键位点和演进

目的:研究人胃癌Runx3基因CpG岛甲基化的关键位点和演进.方法:应用MSP法和Western blot法分别检测26例人胃癌和相应的癌旁正常组织标本Runx3基因CpG岛从5'区向转录起始点方向连续6个位点的甲基化状态和Runx3蛋白的表达.结果:根据MSP的结果计算出上述连续6个位点的甲基化阳性率,结果随着向转录起始点方向的演进,各位点甲基化的阳性率逐渐降低,胃癌组和癌旁组从第3位点开始出现差异,至第5和第6位点差异显著(P＜0.05);按照胃癌分化程度分组,低分化组与高分化组在3-6位点差异显著(P＜0.05).胃癌组与癌旁组Runx3蛋白表达水平(0.499±0.106 vs 0.721±0.080)以及低分化组与高分化组(0.437±0.053 vs 0.617±0.073)Runx3蛋白表达水平均存在显著差异(P＜0.01).结论:人胃癌Runx3基因CpG岛的甲基化从5'区向转录起始点方向演进,甲基化的演进与肿瘤的分化程度有关;转录起始点部位可能为Runx3基因甲基化的关键位点.     

变性梯度凝胶电泳分析检测结直肠癌APC和p53基因突变

目的: 探讨APC和p53基因突变在结直肠癌中的意义.方法:采用变性梯度凝胶电泳(DGGE), DNA测序法分析15例正常人和60例散发性结直肠癌标本的APC基因15外显子和p53基因第5, 7外显子的基因突变.结果: 在结直肠癌组检出14例APC和16例p53基因突变, 测序证实其中13/14例APC发生在突变集中区域;9/16例p53基因突变位于第5外显子, 7/16例p53基因突变位于第7外显子, 2例同时检出了APC基因和p53基因突变.结论:DGGE是一种快速、简便、高效、灵敏的突变检测技术. 同时也证明APC基因突变和p53基因突变均参与了结直肠癌的发生、发展过程.     

大肠肿瘤中Ezrin的表达及意义

目的：检测大肠癌及大肠腺瘤中Ezrin蛋白的表达,了解与大肠癌临床病理的相关因素。方法：采用SP免疫组化法,检测Ezrin蛋白在各组织中的表达及意义。结果：Ezrin在大肠癌、大肠腺瘤中的阳性表达率分别为69.4%（43/62）和40.0%（4/10）,癌旁组织阳性表达率为32.6%（15/46）,正常大肠组织阳性表达率为6.7%（1/15）。Ezrin的表达在正常大肠组织和大肠癌之间、大肠腺瘤和大肠癌之间以及癌旁组织和大肠癌之间均有显著性差异（P〈0.05）,而癌旁组织和大肠腺瘤之间Ezrin表达差异无显著性（P〉0.05）;Ezrin在大肠癌转移组及未转移组中的阳性表达率分别为89.7%（26/29）和51.5%（17/33）;转移组阳性表达率高于未转移组（P〈0.05）;大肠癌组织中Ezrin的表达与患者年龄、性别、肿瘤发生部位、分化程度均无关（P〉0.05）。结论：Ezrin的表达增高与大肠癌转移密切相关,可作为临床判断大肠癌转移及预后等生物学行为的重要参考指标。